PCR metode (polimerāzes ķēdes reakcija) ir modernās DNS diagnostikas "zelta standarts", kas ir ļoti jutīga molekulārās bioloģijas metode. PCR metode tiek izmantota medicīnā, ģenētikā, kriminoloģijā un citās jomās. To bieži un veiksmīgi izmanto daudzu infekcijas slimību diagnostikā.
Infekcijas slimību diagnostika ar PCR
PCR tests ļauj atklāt ne tikai pašu patogēnu, bet pat vienu ārējo DNS fragmentu pētītajā materiālā. Pētītais (bioloģiskais) materiāls ir: vēnu asins, epitēlija šūnas un dzimumorgānu, spermas, siekalu, krēpu un citu bioloģisko ekskrementu noslēpums. Nepieciešamo bioloģisko materiālu nosaka iespējamā slimība.
Protams, PCR metode mūsdienās ir spēcīgs diagnostikas rīks. Varbūt vienīgais pētījuma trūkums ir tā augstā cena.
To slimību sarakstā, kuru klātbūtni var noteikt ar PCR metodi:
- vīrusu un baktēriju pneimonija;
- tuberkuloze;
- masalām, masaliņām, parotitiem;
- visu veidu infekciozais hepatīts;
- salmoneloze, difterija;
- Helicobacteriosis un slimības, ko izraisa zarnu infekcijas;
- STS (seksuāli transmisīvās slimības): gonoreja, hlamīdijas, ureaplazmoze, sifiliss, AIDS, dzimumorgānu herpes, gardnerellez uc
STI skrīnings, izmantojot PCR metodi
Atšķirībā no tradicionālajām analīzēm, PCR tehnika ļauj noteikt seksuāli transmisīvās infekcijas (STI), pat ja to simptomi pilnīgi nav. Bioloģiskā materiāla savākšanai sievietes tiek nosprostotas ar dzemdes kakla kanāla epitēlija šūnām, vīriešiem - urīnizvadkanāla skrāpēšana. Ja nepieciešams, PCR metode veic venozās asins analīzes.
Tādējādi STI tests, izmantojot PCR metodi, ļauj identificēt:
- cilvēka imūndeficīta vīruss (HIV);
- bāla treponēma (sifilisa izraisītājs);
- Herpes simplex vīruss un citomegalovīruss;
- cilvēka papilomas vīruss (HPV);
- hlamīdija, toksoplazma, mikoplazmas, ureaplasma un citas seksuālās infekcijas.
Ja PCR analīze tiek veikta pareizi, tiek izslēgta viltus pozitīvo rezultātu iespējamība. Atsevišķi jāpiemin cilvēka papilomas vīruss (HPV) un PCR metodes nozīme tās diagnostikā. Pretstatā onkocitoloģiskajai uztriepei, PCR metode var noteikt specifisku HPV tipu, jo īpaši tās 16 un 18 veidu onkogēnus, kuru klātbūtne apdraud sievieti ar tik nopietnu un bieži letālu slimību kā dzemdes kakla vēzis . Laika noteikšana par onkogēniem HPV veidiem, izmantojot PCR metodi, bieži vien dod iespēju novērst dzemdes kakla vēža attīstību.
Imūnoenzīmu analīze (ELISA) un polimerāzes ķēdes reakcija (PCR): plusi un mīnusi
Kura diagnostikas metode ir labāka: PCR vai ELISA? Pareiza atbilde uz šo jautājumu neeksistē, jo pēc būtības diagnoze ar šo divu pētījumu palīdzību ir atšķirīga. Un biežāk metodes IFA un PTSR tiek piemērotas kompleksā.
PCR tests ir nepieciešams, lai noteiktu specifisko infekcijas izraisītāju, to var konstatēt uzreiz pēc infekcijas, neskatoties uz to, ka nav slimības simptomātiskas izpausmes. Šī metode ir ideāla slēptu un hronisku baktēriju un vīrusu infekciju noteikšanai.
Atšķirībā no PCR metodes, ELISA metode ir paredzēta, lai noteiktu infekcijas izraisītāju, nevis organisma imūno sistēmu, proti, lai konstatētu antivielu klātbūtni un daudzumu noteiktā patogēnam. Atkarībā no konstatēto antivielu veida (IgM, IgA, IgG), var noteikt infekcijas procesa attīstības stadiju.
Abas metodes, kā arī PCR un ELISA ir augsta ticamība (attiecīgi 100 un 90%). Tomēr ir svarīgi atzīmēt faktu, ka ELISA analīze dažos gadījumos dod nepareizu pozitīvu rezultātu (ja kāda persona jau ir slimo ar noteiktu slimību pagātnē) vai kļūdaini negatīva (ja infekcija tikusi pieņemta salīdzinoši nesen).